與對(duì)照組相比，飼料中添加不同水平的二甲酸鉀可以不同程度地提高刺參體

腔細(xì)胞的吞噬能力，O2-的產(chǎn)量(表 2-3)。當(dāng)二甲酸鉀的添加量為 1.0%及 1.2%的時(shí)候，刺參體腔細(xì)胞的吞噬活性，活性氧 O2-的產(chǎn)量均顯著高于對(duì)照組處理，但1%和 1.2%添加組之間，以及其他水平添加組與對(duì)照組之間，均沒(méi)有顯著差異。隨著飼料中二甲酸鉀含量的提高，刺參 SOD，NOS 均有上升趨勢(shì)，但效果不明顯，沒(méi)有顯著差異。

1.3 飼料中添加二甲酸鉀對(duì)刺參抗?fàn)N爛弧菌感染能力的影響

燦爛弧菌攻毒14d后，對(duì)照組刺參累積死亡率為46.67%，顯著高于0.4%、0.6%、0.8%、1.0%、1.2%二甲酸鉀添加組(26.67%、26.67%、30%、30%、23.33%)，但與0.2%處理組(38.33%)之間沒(méi)有顯著差異，刺參死亡率在0.4%、0.6%、0.8%、1.0%、1.2%二甲酸鉀添加組之間沒(méi)有顯著差異(表2-5)。

2.討論

2.1  二甲酸鉀對(duì)刺參生長(zhǎng)的影響

在動(dòng)物體內(nèi)，二甲酸鉀的作用機(jī)理主要是進(jìn)入胃腸道中，改善腸胃環(huán)境，調(diào)

節(jié) p H，以及對(duì)于有害菌的殺菌作用(Ramli 和 Sunanto，2005)。另外，二甲酸鉀還可以促進(jìn)飼料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，提高養(yǎng)殖動(dòng)物的消化率和利用率。二甲酸鉀促生長(zhǎng)的作用，在畜禽上研究的較多，楊祿良(2007)的實(shí)驗(yàn)證明，日糧中添加二甲酸鉀可以提高仔豬的日增重和采食量。Selle(2004)報(bào)道，在肉雞日糧中添加6g/kg 的二甲酸鉀可以顯著提高肉雞的日增重以及采食量。黃小春(2006)等的實(shí)驗(yàn)也證明，飼料中二甲酸鉀可有效的提高肉雞的特定生長(zhǎng)率。在水產(chǎn)動(dòng)物的應(yīng)用上，有實(shí)驗(yàn)表明二甲酸鉀可以顯著提高對(duì)蝦的生長(zhǎng)及成活率(何夙旭，周志剛等，2006)。本研究證明，飼料中添加二甲酸鉀可以促進(jìn)刺參的生長(zhǎng)，這與此前?verland. M(2000)報(bào)道的二甲酸鉀在仔豬和肥育豬所應(yīng)用的結(jié)果一致。

2.2 二甲酸鉀對(duì)刺參免疫的影響

刺參同其他棘皮動(dòng)物的防御機(jī)制相似，都是是通過(guò)細(xì)胞和非細(xì)胞(體液)免疫

反應(yīng)完成的，主要是對(duì)進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)的異物進(jìn)行識(shí)別、排除，或使異物變成無(wú)害物質(zhì)，以及修復(fù)傷口。棘皮動(dòng)物的細(xì)胞免疫反應(yīng)是由多種體腔細(xì)胞完成的，這些細(xì)胞形成棘皮動(dòng)物自身的防御系統(tǒng)，主要功能包括吞噬作用，細(xì)胞毒素反映，凝血級(jí)產(chǎn)生抗菌活性物質(zhì)等作用(Kudriavtsev，2000)。而體腔細(xì)胞在進(jìn)行吞噬作用時(shí)，可被細(xì)菌或細(xì)菌胞壁組分誘導(dǎo)產(chǎn)生具有殺傷力作用的活性氧自由基，包括NO、H2O2、OH、O2-等。有研究表明，在飼料中添加殼寡糖，左旋咪唑能有效的提高刺參體腔細(xì)胞活性氧的產(chǎn)量(陳效儒，2009；許樂(lè)樂(lè)，2009)，同時(shí)有研究證明，在飼料中添加甘露寡糖，葡聚糖等多糖類(lèi)免疫增強(qiáng)劑可以有效的提高刺參體腔細(xì)胞活性氧產(chǎn)量及吞噬能力(張琴，2010；谷珉，

2010)。本實(shí)驗(yàn)中，在飼料中添加 1.0%、1.2%的二甲酸鉀，顯著提高了刺參體腔細(xì)胞的吞噬活性及活性氧產(chǎn)量。但是，有關(guān)于二甲酸鉀提高細(xì)胞吞噬活性及 O2-產(chǎn)量的機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究。

2.3 二甲酸鉀對(duì)刺參腸道菌群的影響

二甲酸鉀進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)，在弱堿性的環(huán)境中可以分解為甲酸及甲酸鹽，穿過(guò)

細(xì)胞膜進(jìn)入微生物細(xì)胞中，通過(guò)改變細(xì)胞內(nèi)部 p H 值，改變?nèi)绱竽c桿菌、沙門(mén)氏菌等有害微生物的生存環(huán)境，阻止其繁殖，從而起到調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡的作用(Eidelsburger，1998)。Hebeler(2000)等給仔豬飼喂 1.8%的二甲酸鉀，實(shí)驗(yàn)證明小腸中總需氧菌，總厭氧菌，乳酸桿菌及大腸桿菌數(shù)量均顯著下降。而王冉(2001)的實(shí)驗(yàn)結(jié)論認(rèn)為含有二甲酸鉀成分的酸化劑可增加乳酸桿菌數(shù)量，降低大腸桿菌數(shù)量，與 Hebeler 的結(jié)論有一定分歧。Papenbrock(2005)研究發(fā)現(xiàn)在仔豬日糧中添加二甲酸鉀可以減少消化道大腸桿菌的數(shù)量。二甲酸鉀對(duì)于腸道菌群的影響，宏觀上由于二甲酸鉀分解后產(chǎn)生的 H+降低了腸道內(nèi)部的 p H 值，抑制了腸道菌群的生長(zhǎng)，微觀上由于 H+通過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)部，直接破壞了細(xì)胞內(nèi)酶的活性，影響微生物蛋白質(zhì)和核酸的代謝，起到了滅菌作用(Roth，1998)。本實(shí)驗(yàn)證明在飼料中添加二甲酸鉀對(duì)于刺參腸道總菌數(shù)影響不大，有一定下降趨勢(shì)，但可以顯著抑制弧菌數(shù)。沒(méi)有影響到刺參腸道總菌數(shù)的原因可能是二甲酸鉀作用于刺參腸道同時(shí)，阻礙了一部分益生菌及其他細(xì)菌的繁殖，導(dǎo)致總菌數(shù)沒(méi)有顯著差異，并有一定下降趨勢(shì)。

2.4 二甲酸鉀對(duì)刺參抗病力的影響

燦爛弧菌是刺參腐皮綜合癥的致病菌，對(duì)于刺參的生產(chǎn)養(yǎng)殖危害嚴(yán)重。本實(shí)

驗(yàn)攻毒證明，飼料中添加二甲酸鉀降低了刺參感染燦爛弧菌后的死亡率。這可能與二甲酸鉀對(duì)弧菌的抑制作用有一定的關(guān)系。Hebeler(2000)報(bào)道，在仔豬日糧中 添加 1.8%的二甲酸鉀，可以降低仔豬腸道中大腸桿菌的數(shù)量。Daza(2001)研究發(fā)現(xiàn)，在仔豬日糧中添加 1.2%的二甲酸鉀，可以顯著降低仔豬的腹瀉頭數(shù)。目前，有關(guān)二甲酸鉀對(duì)于水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物抗病力的研究還未見(jiàn)有相關(guān)的報(bào)道，二甲酸鉀對(duì)刺參抗病力提高的作用機(jī)理還有待進(jìn)一步的探討。

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)研究表明，飼料中添加二甲酸鉀對(duì)于刺參的生長(zhǎng)有顯著影響，對(duì)刺參

的非特異性免疫力產(chǎn)生了積極的影響，增強(qiáng)了刺參的體液免疫和細(xì)胞免疫。飼料中添加二甲酸鉀顯著減少了刺參腸道中的有害菌數(shù)量，增強(qiáng)了感染燦爛弧菌后的抗病力有影響。綜上所述，二甲酸鉀可以作為一種海參飼料中的免疫增強(qiáng)劑來(lái)使用，建議其適宜添加量為 1.0%。