研究表明，在原料中水分含量較高的情況下，雙乙酸鈉可進(jìn)入霉菌細(xì)胞內(nèi)，通過(guò)對(duì)酶活性的破壞而使霉菌死亡。該結(jié)果與閆革華等報(bào)道基本一致，其發(fā)現(xiàn)雙乙酸鈉對(duì)生鮮牛奶的防霉效果要優(yōu)于其他防霉劑。丙酸鈣已廣泛用于飼料防霉劑，在本研究中所用的四種防霉劑中，其抑菌譜最廣，對(duì)大部分真菌和少部分細(xì)菌都有很好的抑制作用。洪亦武等的研究表明，丙酸鈣對(duì)酵母菌、黑曲霉菌、灰綠曲霉菌和煙曲霉均等十幾種霉菌都有較好的抑制作用。山梨酸鉀在水中溶解度較低，因而可能在發(fā)酵飼料中難以發(fā)揮更好的防霉作用; 檸檬酸發(fā)揮防霉抑菌作用主要是依靠降低環(huán)境pH 來(lái)實(shí)現(xiàn)，由于本試驗(yàn)所用發(fā)酵飼料的pH 較低，所以檸檬酸難以發(fā)揮其酸性防霉效應(yīng)。試驗(yàn)結(jié)果表明， 添加量為0. 30% 的雙乙酸鈉和2. 00%的丙酸鈣防霉效果最佳，其原因可能與幾種防霉劑的作用機(jī)制不同有關(guān)。

本試驗(yàn)中，乳酸濃度在第0 至第1 天時(shí)有緩慢增長(zhǎng)，這可能是由于發(fā)酵飼料中仍有部分乳酸菌產(chǎn)生少量乳酸。隨著試驗(yàn)時(shí)間繼續(xù)延長(zhǎng)，乳酸菌的大量死亡，在第2 天時(shí)乳酸含量開(kāi)始緩慢下降。在保存至第4 天時(shí)，雙乙酸鈉組乳酸含量顯著高于丙酸鈣組和對(duì)照組，暗示雙乙酸鈉組中的酸性物質(zhì)減少量少于丙酸鈣組和對(duì)照組，這可能與雙乙酸鈉的防霉機(jī)理有關(guān)。雙乙酸鈉主要依靠游離出的乙酸分子破壞細(xì)胞內(nèi)的酶系統(tǒng)來(lái)抑制微生物的活性，游離的乙酸也可以有效降低飼料的pH，這與雙乙酸鈉組的pH 值一直低于其他兩組吻合。在本試驗(yàn)中，固態(tài)發(fā)酵飼料的pH 在發(fā)酵結(jié)束后的第2 天開(kāi)始緩慢升高，并在第10 天達(dá)到7 左右，這意味著發(fā)酵飼料中的乳酸和揮發(fā)性脂肪酸等酸性物質(zhì)已經(jīng)幾乎消耗殆盡，這一結(jié)果與Wang等研究結(jié)果相一致。Missotten 等的研究表明，乳酸菌發(fā)酵液體飼料的pH 會(huì)在達(dá)到穩(wěn)定之后緩慢上升，這是由于飼料中菌體的大量死亡裂解，釋放了大量的菌體蛋白，并且飼料中的某些微生物開(kāi)始利用有機(jī)酸和菌體蛋白產(chǎn)生大量含有堿基的代謝產(chǎn)物，這些物質(zhì)會(huì)導(dǎo)致pH 的上升。

黃通旺研究表明，在普通飼料中添加0. 1%的雙乙酸鈉可有效抑制飼料中霉菌的生長(zhǎng)，且作用時(shí)間可以持續(xù)40 天左右。在本試驗(yàn)中，雙乙酸鈉和丙酸鈣均可以有效抑制霉菌至第4 天，至第6 天以后飼料中霉菌數(shù)量超出限量標(biāo)準(zhǔn)，而對(duì)照組的霉菌數(shù)量在第3 天就已經(jīng)超出限量標(biāo)準(zhǔn)。與黃通旺研究結(jié)果不一致的原因可能是飼料性質(zhì)不同、保存條件不同，發(fā)酵飼料由于水分含量高，并且在本試驗(yàn)中暴露于空氣中，霉菌更容易大量生長(zhǎng); 而石傳林等在用雙乙酸鈉作為青貯飼料防霉劑時(shí)發(fā)現(xiàn)，添加雙乙酸鈉的青貯玉米秸質(zhì)地松軟，顏色黃綠、腐爛少，霉菌計(jì)數(shù)結(jié)果顯示比對(duì)照組顯著降低，這與本試驗(yàn)結(jié)果相一致。

考慮到發(fā)酵飼料的主要活性功能物質(zhì)包括乳酸菌等活菌制劑及微生物代謝產(chǎn)物，因此，本實(shí)驗(yàn)同時(shí)研究了防霉劑對(duì)發(fā)酵飼料中乳酸菌數(shù)量的影響，據(jù)Heres 等報(bào)道，在不經(jīng)過(guò)特殊處理?xiàng)l件下，乳酸菌液態(tài)發(fā)酵飼料中乳酸菌的數(shù)量在發(fā)酵結(jié)束后5 d 內(nèi)開(kāi)始大量死亡; Hansen 等也發(fā)現(xiàn)，在液體發(fā)酵飼料中乳酸菌的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期出現(xiàn)在12 ～ 24 h，在進(jìn)入穩(wěn)定期后24 h 菌體開(kāi)始裂解并釋放大量菌體蛋白。在本試驗(yàn)中，添加雙乙酸鈉和丙酸鈣以及對(duì)照組的發(fā)酵飼料中乳酸菌數(shù)量總體都呈明顯下降趨勢(shì)，與前人的研究結(jié)果一致。而丙酸鈣的抑菌作用相對(duì)較強(qiáng)，乳酸菌的繁殖在本試驗(yàn)的開(kāi)始即受到抑制，從這一點(diǎn)來(lái)看，雙乙酸鈉的防霉效果要優(yōu)于丙酸鈣。試驗(yàn)同時(shí)發(fā)現(xiàn)，隨著保存時(shí)間的延長(zhǎng)，添加雙乙酸鈉和丙酸鈣的兩組發(fā)酵飼料中乳酸菌的數(shù)量明顯高于對(duì)照組，可能是兩種防霉劑抑制了霉菌的大量增殖，飼料中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)依然可以被乳酸菌利用進(jìn)而生長(zhǎng)，而對(duì)照組中，乳酸菌數(shù)量呈明顯下降趨勢(shì)，說(shuō)明霉菌在大量繁殖的過(guò)程中可能競(jìng)爭(zhēng)性的抑制乳酸菌的生長(zhǎng)。